Venerdì ho fatto la mia prima PCR in 10 microlitri di volume finale (come mi hanno suggerito) per provare le 24 coppie di primer che ho ordinato.

Risultato? Hanno amplificato 4 su 24….

Allora ho chiesto “consiglio” ai miei colleghi qui e gli ho detto: “Non è che per caso bisogna aumentare un pochino il magnesio?” e loro: “Nooo! Scherzi? è l’ultima cosa che si fa!! Prova a farla in 20 microlitri. Cambia gDNA, cambia acqua, e adesso vediamo anche come la fai.”

Ok… Fatto. Ieri (Sabato) ho corso il gel e… risultato? 0 su 24!!

Bene! Non può e non deve andare avanti così!

Oggi (Domenica) sono tornato in lab. Ho cercato del MgCl2, ho provato solo 5 coppie di primer, aggiunto il magnesio necessario… et voilà!

4 su 5!

Niente male.